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產(chǎn)品中心簡(jiǎn)要描述:微量法:超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)盒中SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動(dòng)物前沿技術、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中預下達,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用的有效手段,生成 H2O2 和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶方案,也是 H2O2 主要生成酶關鍵技術,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用。
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
---|---|---|---|
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 檢測(cè)酶活性 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥 |
注意:正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定深入。
貨號(hào):XZK-W-A500
規(guī)格:100T/96S
微量法:超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)盒產(chǎn)品內(nèi)容:
試劑一:液體 20mL×1 瓶技術研究,4℃避光保存;
試劑二:粉劑 ×1 支開展研究,4℃避光保存結論;臨用前使用20ml試劑一充分溶解,配好的試劑 4℃避光可保存一周質生產力。
試劑三:液體 110μL×1 支適應性強,4℃保存;臨用前將試劑三用蒸餾水稀釋 10 倍推動,用多少配多少相對較高。
試劑四:液體 2.5mL×1 瓶,-20℃保存信息。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀相關、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器豐富內涵、微量比色皿/96 孔板生產效率、研缽、冰和蒸餾
水
產(chǎn)品說明:SOD(EC 1.15.1.1)廣泛存在于動(dòng)物適應性、植物節點、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,催化超氧化物陰離子發(fā)生岐化作用落地生根,生成 H2O2 和 O2的特點。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶,也是 H2O2 主要生成酶有效保障,在生物抗氧化系統(tǒng)中具有重要作用大數據。
微量法:超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測(cè)盒 操作步驟:
一、樣品的前處理:
(1) 細(xì)菌講實踐、細(xì)胞或組織樣品的制備:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)數字技術,離心后棄上清奮戰不懈,按照每 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液(生理鹽水或者PBS),超聲波破碎(功率 20%或 200w措施,超聲 3s有所增加,間隔 10s,重復(fù) 30 次)更高要求。8000g 4℃離心 10 分鐘越來越重要的位置,取上清, 置冰上待測(cè)共同學習。
稱取約 0.1g 組織順滑地配合,加入 1mL 提取液(生理鹽水或者PBS)進(jìn)行冰浴勻漿; 8000g 4℃離心 10 分鐘效高,取上清前沿技術,置冰上待測(cè)。
(2) 血清(漿)樣品:直接檢測(cè)
二性能、測(cè)定操作表:
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上拓展基地,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 450nm,蒸餾水調(diào)零實力增強。
2. 測(cè)定前將試劑一體系流動性、二和四 37℃水浴 5min 以上。
3. 樣本測(cè)定(按順序加入下列試劑)
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 | 對(duì)照管 1 | 對(duì)照管 2 | 對(duì)照管 3 |
樣本 | 10 | |||
蒸餾水 | 10 | 10 | 10 | |
試劑三(稀釋后) | 10 | 10 | 10 | 10 |
試劑四 | 20 | 20 | 20 | 20 |
試劑二 | 160 | 160 | 160 | 160 |
充分混勻帶來全新智能,室溫靜置 30min 后實現了超越,450nm 處測(cè)定各管吸光值 A。
注意事項(xiàng):
1去完善、試劑三為酶橋梁作用,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置求索。
2讓人糾結、對(duì)照管只需要做三管,求平均值穩定發展。
3基石之一、SOD 為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍能力建設?對(duì)照管的范圍是 0.4-1模樣。對(duì)照管吸光值過低可能是:
(1)試劑三活性低,可以適當(dāng)減少稀釋倍數(shù)服務;
(2)沒有按順序加試劑;
(3)反應(yīng)時(shí)間不夠能力和水平,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間可以延長(zhǎng)到 40min)覆蓋。
(4)對(duì)照管吸光值過高可能是試劑三未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)異常狀況。
(5)可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般高效,將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10 倍后再測(cè)應用創新,通常可以使測(cè)定正常機構。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)的特性。
SOD 活性計(jì)算:
1、抑制百分率的計(jì)算
抑制百分率=(A 對(duì)照管-A 測(cè)定管) ÷A 對(duì)照管× 100%
盡量使樣本的抑制百分率在 10-90%范圍內(nèi)基礎。如果計(jì)算出來的抑制百分率小于 10%或大于90%提供堅實支撐,則通常需要調(diào)整加樣量后重新測(cè)定。如果測(cè)定出來的抑制百分率偏高實踐者,則需將樣本用提取液適當(dāng)稀釋取得明顯成效;如果測(cè)定出來的抑制百分率偏低,則需重新準(zhǔn)備濃度比較高的待測(cè)樣本數據。
2創新的技術、SOD 酶活性單位:在上述黃嘌氧化酶藕聯(lián)反應(yīng)體系中抑制百分率為 50%時(shí),反應(yīng)體系中的 SOD 酶活力定義為一個(gè)酶活力單位(U/mL)顯著。
3快速增長、SOD 酶活性計(jì)算:
血清(漿)SOD 活性(U/mL)=[抑制百分率÷(1 -抑制百分率)×V 反總]÷V 樣
=20×抑制百分率÷(1 -抑制百分率)
組織、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞 SOD 活力計(jì)算:
按樣本蛋白濃度計(jì)算
SOD 活性(U/mg prot)=[抑制百分率÷(1 -抑制百分率)×V 反總]÷(V 樣×Cpr )
=20×抑制百分率÷(1 -抑制百分率)÷Cpr
需要另外測(cè)定占,建議使用上海優(yōu)選生物科技有限公司 BCA 蛋白質(zhì)含量測(cè)定試劑盒穩步前行。
按樣本鮮重計(jì)算
SOD 活性(U/g 鮮重)=[抑制百分率÷(1 -抑制百分率)×V 反總]÷(W ×V 樣÷V 樣總)
=20×抑制百分率÷(1 -抑制百分率)÷W
c.按細(xì)菌或細(xì)胞個(gè)數(shù)計(jì)算
SOD 活力(U/104 cell)=[抑制百分率÷(1 -抑制百分率) ×V 反總]÷(500×V 樣÷V 樣總)
=0.04×抑制百分率÷(1 -抑制百分率)
V 反總:反應(yīng)體系總體積,0.2mL動手能力;
V 樣:加入反應(yīng)體系中樣本體積逐步改善,0.01mL;
V 樣總: 加入提取液體積提升,1 mL大大提高;
Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL 研究成果;
W:樣本質(zhì)量取得了一定進展,g;500:細(xì)胞或細(xì)菌總數(shù)大面積,500 萬積極參與。
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