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產(chǎn)品中心簡要描述:微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測,POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物流動性、微生物中大型,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物和諧共生,具有消除過氧化氫和酚類預期、胺類毒性的雙重作用提高鍛煉。POD 在有過氧化氫存在的情況下發展邏輯,能使愈創(chuàng)木酚發(fā)生氧化,生成茶褐色物質有所提升,該物質在 470nm 有最大光吸收聽得進。
產(chǎn)品介紹
品牌 | 軒澤康 | 規(guī)格 | 50管/48樣 |
---|---|---|---|
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 檢測過氧化物酶活性 |
應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),能源,制藥/生物制藥 |
規(guī)格:100T/96S
產(chǎn)品內(nèi)容:微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存先進水平;
試劑一:液體 20mL×1 瓶便利性,4℃保存;
試劑二:液體 0.2mL×1 瓶越來越重要的位置,4℃保存新技術;用時加入 3mL 試劑一,現(xiàn)配現(xiàn)用順滑地配合,可 4℃保存一周深入;
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存前沿技術。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計/酶標儀基礎、臺式離心機、可調式移液器多種方式、微量玻璃比色皿/96 孔板對外開放、研缽、冰和蒸餾水
操作步驟:
一深入交流研討、粗酶液提荣Y料。?/p>
1、細菌關註度、細胞或組織樣品的制備
收集細菌或細胞到離心管內(nèi)橫向協同,離心后棄上清;按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液敢於挑戰,超聲波破碎細菌或細胞(功率 20%迎難而上,超聲 3s,間隔 10s探索,重復 30 次);8000g 4℃離心 10min產業,取上清滿意度,置冰上待測。
稱取約 0.1g 組織可持續,加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿主要抓手;8000g 4℃離心 10min體製,取上清,置冰上待測創新科技。
2服務延伸、血清(漿)樣品:直接檢測。二具有重要意義、測定步驟:
1研究、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調節(jié)波長至 470nm應用創新,蒸餾水調零提高。
2、 測定前將試劑一的特性、二和三在 37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)放置 10min 以上交流。
3、 樣本測定表
試劑名稱(µL) | 測定管 |
試劑一 | 120 |
試劑二 | 30 |
試劑三 | 30 |
蒸餾水 | 60 |
樣本 | 5 |
在 EP 管中按順序加入上述試劑提供堅實支撐,立即混勻并計時還不大,立即取 200µL 轉移至微量玻璃比色皿或 96
孔板中,記錄 470nm 下 30s 時的吸光值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2信息化技術。計算?A=A2-A1發揮作用。
POD 活性計算:
用微量玻璃比色皿測定的計算公式如下
1、按血清(漿)體積計算
單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位系統性。POD(U/mL)=?A÷0.01×V 反總÷V 樣÷T =4900×?A
2勇探新路、按樣本蛋白濃度計算
單位定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位。POD(U/mg prot)=?A÷0.01×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T =4900×?A÷Cpr
3傳遞、按樣本鮮重計算
單位定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位試驗。POD(U/g 鮮重)=?A÷0.01×V 反總÷(W÷V 樣總×V 樣)÷T =4900×?A÷W
4、按細菌或細胞數(shù)量計算
單位定義:每 1 萬個細菌或細胞在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.01 定義為一個酶活力單位開展攻關合作。POD(U/104 cell)=?A÷0.01×V 反總÷(500÷V 樣總×V 樣)÷T =9.8×?A
用 96 孔板測定的計算公式如下
1製度保障、按血清(漿)體積計算
單位定義:每 mL 血清(漿)在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/mL)=?A÷0.005×V 反總÷V 樣÷T =9800×?A
2的有效手段、按樣本蛋白濃度計算
單位定義:每 mg 組織蛋白在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位統籌推進。POD(U/mg prot)=?A÷0.005×V 反總÷(Cpr×V 樣)÷T =9800×?A÷Cpr
3、按樣本鮮重計算
單位定義:每 g 組織在每 mL 反應體系中每分鐘 A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位關鍵技術。POD(U/g 鮮重)=?A÷0.005×V 反總÷(W÷V 樣總×V 樣)÷T =9800×?A÷W
4了解情況、按細菌或細胞數(shù)量計算
單位定義:每 1 萬個細菌或細胞在每mL 反應體系中每分鐘A470 變化 0.005 定義為一個酶活力單位。POD(U/104 cell)=?A÷0.005×V 反總÷(500÷V 樣總×V 樣)÷T =19.6×?A
V 反總:反應體系總體積技術研究,0.245mL重要的;V 樣:加入樣本體積,0.005mL姿勢;V 樣總:加入提取液體積相互融合,1 mL首要任務;T:反應時間,1 min更加完善;Cpr:樣本蛋白質濃度形式,mg/mL;W:樣本鮮重支撐作用,g日漸深入;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬大力發展。
微量法:過氧化物酶(POD)測試盒 活性檢測注意事項:
1豐富內涵、 如一次測定的樣本數(shù)量較多,可將試劑一產能提升、二適應性、三和蒸餾水按照比例混合,在 37℃(哺乳動物) 或 25℃(其它物種)放置 10min通過活化,測定時加入 240µL 即可落地生根。
2、 樣本測定值如果小于 0.005健康發展,可將反應時間延長到 3-5 分鐘有效保障,計算時除以反應時間即可;如果高于 0.5長效機製,可將樣本用提取液進行稀釋講實踐。計算時乘以相應的稀釋倍數(shù)即可。
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