產(chǎn)品內(nèi)容：微量法：過氧化氫酶（CAT）測試盒 活性檢測

提取液：液體 100mL×1 瓶設計標準，4℃保存的過程中；

試劑一：液體 30mL×1 瓶發展契機，4℃保存；

試劑二：液體 125μL×1 瓶促進進步，4℃保存發力。

產(chǎn)品說明：

CAT(EC 1.11.1.6)廣泛存在于動物、植物迎來新的篇章、微生物和培養(yǎng)細胞中共創美好，是最主要的 H2O2 清除酶推動並實現，在活性氧清除系統(tǒng)中具有重要作用。

H2O2 在 240nm 下有特征吸收峰覆蓋範圍，CAT 能夠分解 H2O2信息化，使反應(yīng)溶液 240nm 下的吸光度隨反應(yīng)時間而下降，根據(jù)吸光度的變化率可計算出 CAT 活性實踐者。

微量法：過氧化氫酶（CAT）測試盒 活性檢測需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機約定管轄、可調(diào)式移液器數據、微量石英比色皿/96 孔（UV 板）、研缽發揮、冰和蒸餾水

操作步驟：

一顯著、粗酶液提取：

1開放以來、細菌占、細胞或組織樣品的制備

收集細菌或細胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清提供了有力支撐；按照每 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液激發創作，超聲波破碎細菌或細胞（功率 20％，超聲 3s實事求是，間隔 10s進行探討，重復(fù) 30 次）；8000g 4℃離心 10min服務水平，取上清最新，置冰上待測。

稱取約 0.1g 組織處理方法，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿重要作用。8000g 4℃離心 10min，取上清習慣，置冰上待測充足。

2、血清（漿）樣品：直接檢測導向作用。二方案、測定步驟：

1、 分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上十大行動，調(diào)節(jié)波長至 240nm左右，蒸餾水調(diào)零。

2綜合措施、CAT 檢測工作液的配制：用時在試劑二中加入 25mL 試劑一可靠保障，充分混勻，作為工作液。

3開展、測定前將 CAT 檢測工作液在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其它物種）水浴 10min 以上互動互補。

4、準(zhǔn)備96孔UV 板一塊（非普通酶標(biāo)板意向，普通酶標(biāo)板只能透過可見光意料之外，不能透過紫外光，檢測波長小于 340nm務(wù)必使用UV 板）形式。

5置之不顧、在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本和 190μL 工作液，立即混勻并計時數字化，記錄 240nm

下初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2方便。計算ΔA＝A1-A2。三各領域、CAT 活性計算：

a. 用微量石英比色皿測定的計算公式如下

1應用領域、血清（漿）CAT 活力的計算:

單位的定義：每毫升血清（漿）每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mL)= [ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷V 樣÷T=459×ΔA

2深入闡釋、組織相關性、細菌或細胞中 CAT 活力計算：

（1） 按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/mg prot)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V 樣) ÷T=459×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位提高。

CAT(U/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T=459×ΔA÷W

（3）   按細菌或細胞數(shù)量計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位可以使用。

CAT(U/104 cell)＝[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（V 樣÷V 樣總×500）÷T =0.917×ΔA

V 反總：反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L紮實；ε：H2O2 摩爾消光系數(shù)效高化，4.36×104L/ mol /cm；d：比色皿光徑投入力度，

1cm創造；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL貢獻法治；V 樣總：加入提取液體積設備製造，1 mL；T：反應(yīng)時間攻堅克難，1 min管理；W： 樣本鮮重，g雙向互動；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度效率和安，mg/mL；500：細胞或細菌總數(shù)品牌，500 萬深入開展；109：單位換算系數(shù)發展， 1 mol=109nmol至關重要。

b. 用 96 孔板測定的計算公式如下

1與時俱進、血清（漿）CAT 活力的計算:

單位的定義：每毫升血清（漿）在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位不久前。

CAT(U/mL)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷V 樣÷T=764.5×ΔA

2、組織更高效、細菌或細胞中 CAT 活力計算：

（1） 按樣本蛋白濃度計算：

單位的定義：每 mg 組織蛋白在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位全面協議。

CAT(U/mg prot)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷(Cpr×V 樣) ÷T =764.5×ΔA÷Cpr

（2） 按樣本鮮重計算：

單位的定義：每 g 組織在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位。

CAT(U/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（V 樣÷V 樣總×W）÷T=764.5×ΔA÷W

（3）   按細菌或細胞數(shù)量計算：

單位的定義：每 1 萬個細菌或細胞在反應(yīng)體系中每分鐘催化 1nmol H2O2 降解定義為一個酶活力單位具體而言。

CAT(U/104 cell)=[ΔA×V 反總÷（ε×d）×109]÷（V 樣÷V 樣總×500）÷T=1.529×ΔA

V 反總：反應(yīng)體系總體積新的動力，2×10-4 L；ε：H2O2 摩爾消光系數(shù)發展契機，4.36×104 L / mol/ cm；d：96 孔板光徑過程中，

0.6cm去突破；V 樣：加入樣本體積，0.01 mL達到；V 樣總：加入提取液體積智能設備，1 mL；T：反應(yīng)時間蓬勃發展，1 min特點；W： 樣本鮮重，g重要性；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度又進了一步，mg/mL；500：細胞或細菌總數(shù)多元化服務體系，500 萬規劃；109：單位換算系數(shù)， 1 mol=109nmol深度。

注意事項：

出現(xiàn)負值怎么辦帶動擴大？ 首先檢查吸光值是否超過 3，如果超過3很可能是沒有用UV 板開拓創新，請換用 UV 板持續發展。如果未超過 3，仍然出現(xiàn)負值則檢查反應(yīng)過程是否產(chǎn)生氣泡促進善治，氣泡多說明酶活性太高擴大，氣泡影響 產(chǎn)生了負值，可以將樣本用提取液稀釋 10 倍后再檢測實事求是。如果稀釋樣本或反應(yīng)體系沒有產(chǎn)生 氣泡仍然出現(xiàn)較小的負值進行探討，說明該樣本測不到該酶活落到實處。

• 微量法：超氧化物歧化酶(SOD)活性檢測盒
• 微量法：過氧化物酶（POD）測試盒 活性檢測